Informe de CI: Los hallazgos de la investigación de Pichugin conducen a nuevas soluciones de lavado

 

por Robert CW Ettinger,
enero de 2002

Como resultado de algunas de las investigaciones del Dr. Yuri Pichugin, director de investigación del Cryonics Institute, se han realizado cambios en la solución de lavado y en la solución del vehículo perfundido. A continuación se muestran las composiciones de las nuevas soluciones, que producen resultados significativamente mejores que las soluciones anteriores.

Además, se había debatido internamente y con varios consultores sobre los méritos de las soluciones o ingredientes utilizados o recomendados por otros. En particular, algunos habían recomendado el uso de HES en lugar de manitol en la solución de lavado, y algunos habían recomendado el uso de soluciones de preservación de órganos como Viaspan y sus sucesores y competidores, incluida una solución conocida como m-RPS-2, una preservación renal modificada. solución, que se diferencia de la nueva solución de vehículo CI en que contiene glutatión. Se hicieron comparaciones directas, como se resume a continuación, y se encontró que las alternativas sugeridas no eran mejores que las nuevas soluciones ahora adoptadas.

El siguiente es mi resumen, y no el informe completo del Dr. Pichugin, pero creo que he evitado errores e incluido lo esencial.

A. La nueva solución de lavado CI:

	mM / L	Peso molecular	gramos / L
KCI	30,0	74,55	2,24
NaHCO 3	10.0	84.01	0,24
KH 2 PO 4	7.2	136,1	0,98
MgCl 2 • 6H 2 O	2.0	246,48	0,49
Glucosa	180,0	180,20	32,44
Manitol	50,0	182,17	9.11

 

Para ajustar el pH de la solución a 7,6, disuelva 1 g de KOH en 2 ml de agua destilada y agregue 15 gotas de esto por cada litro de solución.

B. La nueva solución de vehículo de perfundido de CI (a la que se añade glicerol en etapas):

Igual que el anterior excepto que no hay manitol.

C.Comparación de una nueva solución de lavado de CI con una que usa HES (50 g / L) en lugar de manitol:

Se incubaron rodajas de hipocampo de cerebro de rata a 29ºC durante una hora antes de su uso. Luego, las rodajas se mantuvieron en el CI o en la solución de comparación durante 4 horas a 0ºC, luego se incubaron en la cámara de Oslo durante una hora para su recuperación y luego se analizaron para determinar la relación K / Na en el espectrómetro de llama.

Los cortes de control mostraron una relación promedio de aproximadamente 2,83, con una desviación estándar de aproximadamente 0,28 en la primera serie. Después de estar en la solución de lavado de CI como se indicó, la proporción en la primera serie promedió 2,36, SD 0,15 - viabilidad ligeramente menor que los controles. En la solución con HES, la relación promedio fue de 2,55, SD 0,22. No hubo diferencia estadísticamente significativa entre la solución con manitol y la solución con HES. Una serie repetida de cada uno produjo resultados esencialmente idénticos.

La comparación de la nueva solución de vehículo de CI con m-RPS-2 se realizó de manera similar, con resultados casi idénticos: sin diferencias significativas.